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蛋白質原核表達技術服務

蛋白質原核表達技術服務

世聯博研生命科學服務中心提供高質量的原核蛋白表達服務。世聯博研生命科學服務中心已建立整套的基因克隆與表達體系，無論是單個基因的克隆、表達與純化，還是多個基因高通量的基因克隆、表達和純化，均能選用適合您試驗（科研項目）需要的表達系統和合適的表達載體為您提供you質的服務。

收費標準及服務周期

2500元/1mg，10mg以內每增加1mg加入1000元成本費。2-4周（帶標簽）

3500元/1mg，10mg以內每增加1mg加入1500元成本費。4-6周（不帶標簽）

服務內容

1.客戶可提供必要的資料及以下任意一種方式：

⑵提供經測序驗證的目的PCR產物或模板，由我們為您克隆在相應的載體上（基因克隆費用另計）；

⑶提供相關資料及核酸／蛋白序列，由我們利用生物信息學的方法進行分析處理后提出具體可行的實驗方案并付諸實現（基因合成及亞克隆費用另計）。

2.目的基因亞克�。何覀兛梢蕴峁┒喾N原核表達載體，以滿足不同的實驗要求。我們提供構建好的質粒、（相應的）菌株及測序報告。（參見原核表達載體構建服務）

3.我們還可以應客戶的要求進行原核表達蛋白的大量表達與純化。

服務程序

1.可在我公司網站內直接填寫《蛋白質原核表達服務訂單》發至我公司郵箱。

2.可下載訂單，填寫完成后，用傳真的形式發到我公司。

3.可電話聯系詳談有關具體要求和服務內容。

4.簽訂《蛋白質原核表達服務合同》，預付實驗總費用的50%作為實驗預付款。

5.寄送：委托單位的試驗材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄，有低溫要求的、固定要求的，按低溫保存、固定防碎方法運輸，以確保實驗物品的安可靠。

6.實驗結束后，本公司將結果及時發給客戶，同時根據客戶要求處理相關材料：

b、Western blot檢測結果

c、you化的蛋白純化條件

d、純化蛋白

e、實驗流程及結果

7.客戶應對所提供的材料及信息負責，如因客戶提供的材料及信息不準確而引起的實驗延誤或經濟損失由客戶承擔。

服務咨詢及技術支持

電話:

Email:slby800@163.com

實驗原理

1、E . coli表達系統

E . coli是重要的原核表達體系。在重組基因轉化入E . coli菌株以后，通過溫度的控制，誘導其在宿主菌內表達目的蛋白質，將表達樣品進行SDS-PAGE以檢測表達蛋白質。
2、外源基因的誘導表達
提高外源基因表達水平的基本手段之一，就是將宿主菌的生長與外源基因的表達分成兩個階段，以減輕宿主菌的負荷。常用的有溫度誘導和藥物誘導。本實驗采用異丙基硫代-β-D-半乳糖昔（IPTG）誘導外源基因表達。不同的表達質粒表達方法并不完相同，因啟動子不同，誘導表達要根據具體情況而定。

實驗流程

大腸桿菌和酵母蛋白表達系統

FAQ（Frequently Asked Questions）

1.大腸桿菌蛋白表達實驗中需要注意的事項？

（1）ALL操作盡量在冰上操作，以避免蛋白質發生變性；

（2）根據自己的需要選擇不同的表達載體，并注意不同的表達載體上的融合標簽和攜帶的抗性基因，其中有些標簽是可以去除的。

（3）構建好的載體好進行測序驗證，保證讀碼框正確，即沒有移碼。

（4）長期保存的pET重組子在高濃度甘油中會導致質粒不穩定。

（5）37 ℃生長常常會使一些蛋白累積形成包涵體，而30 ℃生長則可能產生可溶的和有活性的蛋白。在某些情況下，低溫（15－20℃）延長誘導時間可以使溶解性蛋白的產量達到大。

（6）進行SDS-PAGE分析時，需you化電泳上樣體積。

2.我需要表達某蛋白，用于制備多（單）克隆抗體的制備，是采用真核表達還是原核表達好？

采用原核表達就夠了。