HCG 是懷孕的重要標志物,由早期囊胚分泌。因此,如能定量檢測胚胎培養基中懷孕相關的生物標志物如 HCG 等,則能大大輔助無創胚胎選擇,提高移植成功率。但目前的技術性壁壘,是胚胎上清的懷孕標志物含量過低,低至常規檢測手段的靈敏度下限。
為了確定胚胎培養基中HCG的檢測限,證明超靈敏 Simoa 平臺可以用來檢測胚胎培養基中的 HCG 水平,并研究 HCG 水平與胚胎生存能力之間的關系,美國波士頓 Beth Israel Deaconess 醫療中心和試管嬰兒中心的科研人員聯合 Quanterix 公司,將最新最靈敏的單分子級 simoa 技術用于檢測植入前配體培養基中的 HCG 水平,發現移植成功的囊胚培養基中的 HCG 水平較高。
研究方法
這是一項胚胎培養基的回顧性隊列研究,檢測兩種胚胎培養基:(1)Continuous Single Culture(CSC),Irvine,含血清蛋白補充劑(serum protein supplement,SPS),Origio;(2)Embryoglue(EG), Vitrolife。從轉移或冷凍的囊胚中獲取培養基。所有樣品都經過鑒定。使用 Quanterix 開發的超靈敏 Simoa 平臺對培養基中的 HCG 水平(pg/ml)進行檢測,并與編碼數據庫進行匹配,以確定臨床妊娠(fetal heart beat: FHB)是否源于移植胚胎。
研究結果
進行了兩組分析
第一組:CSC+10%SPS 培養基,胚胎在該培養基中生長5天,結果顯示植入和非植入胚胎的 HCG 無差別,因為 SPS 中的 HCG 水平較高。
第二組:EG+重組白蛋白培養基(無血清),移植前胚胎在該培養基中生長2-5小時,EG 培養基空白對照顯示不含 HCG,2個陽性 FHB 和2個陰性樣本之間的 HCG 水平有顯著差異。為模擬人體胚胎隊列,對10個 EG 培養基和樣品進行盲測(5個陽性 FHB 和5個陰性),并檢測2個空白對照。基于 Simoa 檢測的 HCG 濃度進行排序,前4個胚胎中檢測出3個陽性。
檢測結果在很大程度上與胚胎在培養基中培養的時間相關,另外需要用干凈的不會掩蓋原始信號的培養基補充劑。研究結果表明,超靈敏 Simoa 平臺,可以作為胚胎選擇的重要輔助手段。(生物谷Bioon.com)
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