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酶聯免疫(ELISA)服務 世聯博研生命科學服務中心提供酶聯免疫(ELISA)服務。ELISA是繼免疫熒光和放射免疫之后又一具有重大意義和深遠影響的免疫技術。該技術利用蛋 白和聚苯乙烯表面疏水吸附的特性,將抗原-抗體te異性反應固定于固相載體表面進行,同時結合酶對底物的高效催化作用產生高靈 敏度的實驗技術。由于酶的高效生物催化作用,一個酶分子在數分鐘內可以催化幾十或幾百個底物分子發生反應,產生了放大效應 ,使得原來微乎其微的抗原或抗體在數分鐘后就可被檢測出來,因此可成功應用于標本中微量物質含量的測定。 客戶須知(對材料的要求、注意事項) 1.液態類標本(細胞培養上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等); 2.樣本量:每個樣本收集體積=120ul*檢測指標數; 3.樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標號后,置-20℃或-70℃保存; 4.請提前告訴我們:您樣本的種屬(人、大鼠、小鼠、兔、豬等)、樣本數量、待測指標。 在收集標本前必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。 服務周期 1~2周左右,視樣本量而定。 收費標準 組織樣本蛋白提取定量80元/ 樣;300元/單次檢測 公司可代購客戶所需要的ELISA試劑盒,費用另計,也可由客戶自行提供,請來電詳詢。 服務程序 1.可在我公司網站內直接填寫《酶聯免疫(ELISA)服務訂單》發至我公司郵箱。 2.可下載訂單,填寫完成后,用傳真的形式發到我公司。 3.可電話聯系詳談有關具體要求和服務內容。 4.簽訂《酶聯免疫(ELISA)服務合同》,預付實驗總費用的50%作為實驗預付款。 5.寄送:委托單位的試驗材料和試劑等均須采用te快專遞形式郵寄,有低溫要求的、固定要求的,按低溫保存、固定防碎方法運輸,以確保實驗物品的安可靠。 6.實驗結束后,本公司將以下結果及時發給客戶,同時根據客戶要求處理相關材料: ·實驗方法、步驟、所用試劑、儀器等。 ·實驗結果將以電子或書面形式提交給您。 服務咨詢及技術支持 ·電話: ·Email:slby800@163.com 服務項目簡介 ELISA 的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗 原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶 的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起 反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物 質分開。 再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反 應的底物后,底物被酶催化 成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。 由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測 定方法達到很高的敏感度。
技術步驟 雙抗體夾心法是檢測抗原常用的方法,以此為例,總體操作步驟如下: 1)將te異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。 2)加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。 3)加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。 4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。 應用領域 適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。 FAQ(Frequently Asked Questions) 1. 可用作ELISA實驗的標本有哪些? 可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。 2. ELISA實驗中加樣有哪些需要注意的地方? 在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并 注意不可濺出,不可產生氣泡。加標本一般用微量加樣器,按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴,以免發生交叉污染, 也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在 板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1 min以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定 量多道加液器,使加液過程迅速完成。
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